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賽智科技推出【嘔吐毒素】的高效液相色譜HPLC檢測方案

【嘔吐毒素】
脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)又稱嘔吐毒素(vomitoxin),主要是由鐮刀菌的某些種產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性相似的有毒代謝產(chǎn)物——單端孢霉烯族化合物中的一種。DON 的主要產(chǎn)生菌是禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum),據(jù)報(bào)道也有其它一些鐮刀菌可產(chǎn)生 。DON的化學(xué)名為3a,7a,l5一三羥基一l2,l3一環(huán)氧單端孢酶一9一烯I8酮,是一種B型單端孢酶烯族化合物,為一種倍半烯衍生物。分子量為296.3,分子式為C15 H20O6 ,結(jié)晶為無色針狀,熔點(diǎn)為l5l~153 ℃,α,β一不飽和酮基致使其在短波紫外下有吸收峰。但此紫外吸收與其它許多物質(zhì)紫外吸收相重疊,并非特征性的。DON易溶于水和極性溶劑甲醇、乙醇、乙腈、丙酮及乙酸乙酯,但不溶于正己烷和乙醚。1988年Shepherd和Gilbert證實(shí)DON在有機(jī)溶劑中穩(wěn)定,因此乙酸乙酯和乙腈是最適合的溶劑,長期儲(chǔ)存更是如此。DON耐熱、耐壓,弱酸中不分解,加堿及高壓處理可以破壞其部分毒力。DON的耐藏力也很強(qiáng)。據(jù)報(bào)道病麥經(jīng)4年的貯藏,其中的DON仍能保留原有的毒性 。

 

【作用】
DON廣泛存在于全球,主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物,也污染糧食制品,人和動(dòng)物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng)。另外,它還常與其它的霉鹵毒素如黃曲霉毒素共同污染農(nóng)作物,進(jìn)入人體后可以相互影響。近年來發(fā)現(xiàn)DON可能與人類食管癌、IgA腎病有關(guān),對(duì)人類及動(dòng)物的健康構(gòu)成威脅。DON屬于劇毒或中等毒物,研究表明,DON在體內(nèi)可能有一定的蓄積,但無特殊的靶器官,具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性。人畜攝入了被DON污染的食物/飼料后,會(huì)導(dǎo)致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀,嚴(yán)重時(shí)損害造血系統(tǒng)造成死亡,但不同的動(dòng)物對(duì)DON的敏感程度不一,豬是最敏感的動(dòng)物。研究表明,DON可能對(duì)免疫系統(tǒng)有影響,有明顯胚胎毒性和一定致畸作用,可能有遺傳毒性,但無致癌、致突變作用。由于DON的危害嚴(yán)重,引起了各國的普遍重視。谷物及飼料中DON的含量有嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)。我國谷物中DON 的限量標(biāo)準(zhǔn)為1.0 mg/kg 。

 

【樣品處理過程】
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:準(zhǔn)確稱取一定量標(biāo)準(zhǔn)品,用甲醇+乙腈(1+1)溶解,配成0.1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)液。標(biāo)準(zhǔn)工作液:根據(jù)使用需要準(zhǔn)確吸取一定量的嘔吐毒素儲(chǔ)備液,用流動(dòng)相稀釋,分別配成相當(dāng)于1μg/ml、2μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)工作液。用0.45μm的有機(jī)系濾膜過濾,精密量取10μL,注入液相色譜儀,記錄色譜圖。
樣品處理:選取有代表性的樣品粉碎過40目篩,稱取25g(精確至0.01g)樣品于250mL具塞三角瓶中,加5.0g聚乙二醇,加入100mL水,置于回旋式震蕩期中200r/min震蕩20min,靜置,用定量濾紙過濾后再用玻璃纖維濾紙過濾至濾液澄清,待凈化。
凈化過程略。

 

【色譜條件】
色譜柱: C18反相色譜柱, 4.6 mm*250 mm,粒度5 μm
流動(dòng)相:甲醇:水=20:80
波長:218nm  
流速:1.0mL/min
進(jìn)樣量:10μL
柱溫:30℃

 

【譜圖】

圖片1.jpg

 

【儀器配置】

QQ圖片20160104100602.png

 

 

 

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